Traut’s Reagent
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Traut’s Reagent
产品信息
货号
名称
规格
品牌
10-1042
Traut’s Reagent
5mg
宝天
宝天生物Traut’s Reagent(2-lminothiolane 或 2-1T)是一种用于硫代化(巯基加成)的环状硫代亚胺化合物。Traut’s Reagent可与伯胺(-NH)反应引入巯基(-SH),同时保持与原始氨基类似的电荷特性。加入巯基后,巯基可在各种标记、交联和固定程序中作为反应的特定活性位点。
反应特异性:在 pH 值为 7-9 时,Traut’s Reagent能自发地与伯胺发生高效反应。在 pH 值较高的情况下它还能与脂肪族和酚羟基发生反应,不过,这些反应的速率比与胺基发生反应的速率低 100 倍,而且在胺存在且反应时间不过夜时,不会发生任何明显的反应。
反应缓冲液:使用 Traut’s Reagent进行硫代反应时,可以使用各种缓冲液。蛋白质(如抗体)或肽的修饰最好在磷酸盐缓冲液或PH8 的 0.1M 硼酸盐缓冲液中进行,其他不含伯胺且能保持蛋白溶解度的缓冲液也同样适用。对核糖体蛋白进行修饰时,文献中最常引用的缓冲液是 50mM Triethanolamine·HCl(含lmM MgCl2、50mMKCl,pH 8.0)。多糖修饰(只有在不存在胺的情况下才有可能)最好在高 pH 值条件下进行,如在 20mM 硼酸钠缓冲液(pH 值为 10)中。
水解速率和反应化学计量:Traut’s Reagent在没有伯氨基的酸性或中性缓冲液中非常稳定。即使在碱性条件下,水解速度也比与伯胺反应的速度慢。例如,在 pH 8 的 30mM Triethanolamine缓冲液中,试剂水解的半衰期约为 1 小时,而在相同的缓冲液中与伯胺( 20 mM甘氨酸)反应消耗试剂的半衰期约为 5 分钟。由于水解速度慢于胺反应速度,因此使用Traut’s Reagent进行硫代化不需要像其他类型的修饰试剂(如 SATA)那样加入过量的试剂摩尔比。大多数情况下,使用 2 倍摩尔过量的特劳特试剂就足以确保有效的修饰。对于有许多赖氨酸残基的大型蛋白质,调整反应中Traut’s Reagent的摩尔比可以控制硫醇化的程度。例如,对于 lgG 分子(150kDa),使用 10倍摩尔过量的 Traut’s Reagent进行反应,可确保所有抗体分子至少修饰出3-7 个巯基。相比之下,几乎所有可用的伯胺(在典型的 IgG 中约有 20 个)都可以用 50 倍摩尔过量的试剂进行巯基化,但这会对抗体功能产生不利影响。
注意:应立即对Traut’s Reagent生成的巯基进行下一步反应,因为随着时间的推移,巯基可能会氧化成无反应的二硫键。
产品性质
分子量: 137.63
吸收最大值(在乙腈或0.1N HCl中): 248nm
消光系数(在0.1N HCl中): 8840M-1cm-1(+/-5%)
运输及储存
运输条件:室温
储存条件:收到产品后 4℃干燥 保存。
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