SPDP Crosslinkers

SPDP Crosslinkers 

产品信息

产品应用

宝天生物 SPDP 试剂是一组独特的胺和巯基反应型双官能团交联剂。无论是用于在分子间形成胺-胺交联还是胺-巯基交联，SPDP 试剂都能产生含二硫化物的连接键，这种连接可在以后用还原剂（如DTT或TCEP）进行裂解。

SPDP 试剂的胺反应部分是 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）酯。反应通常在在 pH 值为 7-8 的磷酸盐、碳酸盐/碳酸氢盐或硼酸盐缓冲液中进行。其他缓冲液只要不含伯胺也可使用。SPDP反应和水解的速率随pH的增加而增加；例如，NHS酯在pH 7时的半衰期为几个小时，在pH 9时的半衰期少于10分钟。像SPDP这样的NHS-酯试剂在水中的溶解度较低，必须在添加到反应混合物之前溶解在有机溶剂中。

SPDP 试剂的巯基反应部分是 2-吡啶二硫代基团，它与巯基的最佳反应pH 值在 7-8 之间 ，反应的结果是吡啶-2-硫酮基团发生位移，其浓度可通过测量 343nm 处的吸光度来确定。在需要淬灭或还原 2-吡啶基二硫化物之前，反应缓冲液必须不含硫醇和二硫还原剂。

用 SPDP 试剂在蛋白之间形成可裂解的偶联有两种基本方法，这取决于参与偶联的一种或两种蛋白除了伯胺外是否含有巯基（-SH）。这两种偶联方法产生的偶联在间隔臂中都含有二硫键，可以通过DTT或其他还原剂还原而裂解。在大多数情况下，使用 SPDP 试剂生成的偶联物可在 pH 4.5 的条件下用 25 mM DTT或TCEP 还原而使原生蛋白的二硫键断裂。如果不需要考虑保留原生二硫键时，用 DTT或TCEP 在 pH 7-9 时进行还原最高效。

使用 SPDP 试剂进行的偶联实验并不局限于涉及蛋白的实验，任何带有伯胺（-NH2）和巯基的分子都可以使用SPDP 试剂进行修饰或偶联。

下图所示使用SPDP 试剂的两种蛋白的偶联方案。如果一种蛋白已含有巯基，则只需用 SPDP 试剂修饰一种蛋白，只需使用反应 A 和 C。如果两种蛋白都不含巯基，则分别用 SPDP 试剂修饰两种蛋白（反应 A），然后用还原剂处理其中一种蛋白以暴露巯基（反应 B），最后将两种蛋白偶联（反应 C）。

运输及储存

运输条件：低温

储存条件：收到产品后放在-20℃下干燥保存。